protein a 介质-层析介质-纳微科技股份有限公司

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    2022-5-30

任红茹
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层析介质粒径大小及均匀性对生物分离的影响



层析介质粒径大小和分布是影响其分离性能很重要的参数之一。粒径越小,分布越均匀,疏水层析介质,柱效越高,分辨率越高。因此制备精l确的粒径大小及高度的粒径均一性的单分散层析介质一直是业界追求的目标。纳微成功开发出单分散大孔聚合物层析介质可以用于分离生物大分子。纳微单分散层析介质的研发成功不仅填补国内这一领域的空白,也为单分散层析介质的发展做出贡献。




介质孔径大小及孔隙率对生物分离的影响

除了粒径大小和分布会影响层析介质分离性能外,孔径大小、比表面积及孔隙率也是生物分离纯化介质参数之一。层析分离模式主要是分子与介质表面功能基团作用的结果,层析介质可及比表面积是影响其吸附载量的主要因素,可及比表面积是分子可到达的内孔表面积加上介质外表面积。由于内孔表面积占据整个比表面积的90%以上,而内孔表面积主要由孔径大小,孔隙率来决定。孔径越小比表面积越大,但如果孔径太小,目标生物分子进不去,这样的小孔及其表面积对分离是没有作用的。孔径太大,比表面积也会降低,因此对于不同分子量大小的生物分子,有个的孔径大小,其可及表面积,分离。比如用于抗l生素这类分子量小的生物分子,孔径一般选择小于30纳米以下,而对于抗l体蛋白分离纯化的介质一般选择孔径在100纳米左右,而对于---这种大尺寸的生物体,连续流层析,需要400纳米以上---孔的介质。---孔径介质制备技术难度---,层析介质,这也是为什么目前没有好的层析介质可以有效分离---的原因之一。





protein a 配基

   除了基球之外,protein a 配基也是影响介质性能重要因素,尤其是介质的寿命。ge之所以垄断protein a 亲和层析介质市场,主要的是ge拥有耐碱性protein a 技术,其技术是通过基因工程改变b domain 不耐碱的3个---酸以---其耐碱性能。纳微通过优化组合不同片段设计出新序列的protein a 配基,protein a 介质,不仅耐碱性好,而且具有自主---,并能自主实现---生产。纳微---的耐碱性配基加上具有性能的基球,及优化偶联工艺开发出的protein a 亲和介质。以下是某单抗项目上unimab介质载量随使用次数增加的衰减变化表。每个cycle采用0.1m氢l氧化钠cip,接触时间1小时。连续200个cycle 后dbc10%依然在初始值的75%左右,充分体现了纳微proteina介质的---耐碱性。



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